EGFR的激酶区共有3个结合位点，分别是ATP结合位点、变构结合位点以及失活位点，失活位点无法被小分子靶向，故已报导的EGFR-TKIs主要可分为三大类，其一为ATP竞争性的抑制剂，结合在ATP结合位点，已上市的EGFR-TKIs均属这一类别；其二为变构抑制剂，结合在变构口袋，已有临床前小分子披露；此外，也有同时结合ATP口袋及变构口袋的临床前小分子报导。 ATP竞争性抑制剂该类抑制剂为四代EGFR-TKI开发的主流方向，与胞内ATP竞争结合EGFR，对小分子的激酶抑制活性要求较高。截至2022年9月，已有10个小分子进入临床，其中有6个来自中国医药企业，包括正大天晴、贝达、齐鲁、豪森等。①BLU-945，由Blueprint公司经高通量筛选后优化得到，对双突变、三突变的EGFR均有效，在ex19del/T790M/C797S、L858R/T790M/C797S的BaF3细胞IC₅₀分别为4.4和2.9 nM，细胞活性极佳，与此同时，其对wt EGFR的IC₅₀为544 nM，选择性超过200倍。在针对奥希替尼耐药患者的I期剂量递增试验中，也观察到较高的安全性，与wt EGFR抑制相关的副反应极少，80%以上的患者实现了T790M和C797S的ctDNA下降，缩瘤效果明显。②BLU-701也是由Blueprint开发的四代EGFR抑制剂，和BLU-945互为补充，对BLU-945抑制活性不强的单突变及双突变EGFR有强活性，目前也处于I期临床研究中。 ③JIN-A02由韩国J INTS BIO公司开发，对携带三突变或双突变的BaF3细胞IC₅₀均在50 nM左右，此外，对ex19del/T790M/L718Q、L858R/T790M/L718Q等罕见突变也具有一定活性（60-100 nM），对wt EGFR的选择性接近15倍。在PDC模型中，50 mg/kg和60 mg/kg QD也可显著抑制小鼠肿瘤生长，TGI分别达到91.7%和95.7%。 ④BBT-176由韩国化学技术研究院在ALK抑制剂Brigatinib的基研上开发得到，后将全球权益授权Bridge Biotherapeutics公司，是全球第一个进入临床的四代EGFR-TKI，2021年4月便开始了剂量递增试验，已披露的数据显示其安全性较好，未报道剂量限制性毒性或因TRAE导致的停药，并已观察到初步疗效。 ⑤国内EGFR四代抑制剂的玩家众多，竞争激烈，正大天晴(TQB3804)、贝达(BPI-361175)、齐鲁(QLH11811)、豪森(HS10375)、红云生物(H002)、成都地奥九泓(DAJH-1050766)均已推进到临床一期的剂量递增试验，查询专利发现，这些四代EGFR-TKI均是由Brigatinib改造得来，Brigatinib最早于2017年4月获FDA批准用于ALK突变阳性的NSCLC患者，后续研究发现该分子同时也能抑制C797S突变的EGFR，对三突变EGFR的BaF3细胞抑制活性达到了100 nM，而且又是上市药物，成药性非常好，相信这也是中韩药企纷纷选择Brigatinib作为先导化合物的原因。根据专利的披露，国内药企的分子酶抑制活性及细胞活性均可达到10 nM级，PK/PD也相当不错，仅在对野生型的选择性上略有差异。 ⑥除了临床中的化合物，临床前也有不少高活性、高结构新颖性的四代EGFR-TKI披露，比如勃林格殷格翰公司的BI-4020、中外制药的CH7233163，在19年及20年便已披露结构，但似乎并未往临床推进。 变构抑制剂结合EGFR的变构口袋，改变EGFR的构象使其活性被抑制。对野生型具有高选择性，目前仍处于临床前，且由于EGFR的二聚化导致其单药体内无效，但针对先导变构抑制剂的进一步的开发研究仍在继续，科学家们始终相信通过对结构进行优化可以实现单药有效。今年4月由Dana-Farber 癌症研究所研究人员发表在Nature Cancer上的论文迈出了关键的一步，其在JBJ-04-125-02基础上开发的变构抑制剂JBJ-09-063实现了体内单药有效。相信随着研究的深入，第一个进入临床的EGFR变构抑制剂也将很快到来。 双位点抑制剂同时占据ATP结合位点和变构位点，研究还处于相对较早期，在研究论文中多有报导，主要是在EGFR-TKI或变构抑制剂的基础上，进行基于结构的合理设计来增加对另一结合口袋的亲和力，从文献数据来看，激酶抑制活性尚可，但可能是由于分子量较大，膜渗透性不佳，导致细胞活性较差，未来需要进一步优化精简其结构以提高活性。

总结

目前已有不少药企投入到四代EGFR-TKIs的开发中去，主要的开发路径有两种，一种是通过高通量筛选得到具有新颖结构的先导分子，再进一步的对活性和成药性进行优化得到临床候选化合物；另一种则是对已上市的Brigatinib进行改造，提高其抑制活性，并产生可专利的结构，国内已进入临床的分子均由该路径研发得到。

(资料图)

从专利来看，该赛道玩家众多，远不止已进入临床的10个小分子，竞争相当激烈。而如果新一代药物仅仅定位于三代TKIs耐药后的二线甚至三线治疗，那么市场天花板相对较低。

因此，最有市场潜力的四代TKI应当是对C797S突变EGFR有效的同时，也能显著抑制一代二代TKIs针对的单突变或双突变（L858R、del 19、T790M等），以方便在后续研究中提升其临床治疗地位，覆盖更多患者。

参考文献：

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[3] Shi K, Wang G, Pei J et al. Emerging strategies to overcome resistance to third-generation EGFR inhibitors. J Hematol Oncol. 2022 Jul 15;15(1):94.

[4] Maity, S., Pai, K.S.R. & Nayak, Y. Advances in targeting EGFR allosteric site as anti-NSCLC therapy to overcome the drug resistance. Pharmacol. Rep 72, 799–813 (2020).

[5] 谷歌专利

[6] To C, Beyett TS, Jang J, et al. An allosteric inhibitor against the therapy-resistant mutant forms of EGFR in non-small cell lung cancer. Nat Cancer. 2022;3(4):402-417.

来源：BiG生物创新社

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